فحص البراز Stool Examination
طريقة اجراء تحليل البراز بالتفصيل
يجب مراعاة آلاتي :
- يجب اخذ عينة البراز في وعاء بلاستيك نظيف بغطاء.
- يجب وضع بيانات صاحب العينة علي الوعاء.
- يجب التنبيه علي صاحب العينة بعدم خلط عينة البراز بمواد أخريمثل البول.
- يجب فحص العينة فور أخذها.
- ضرورة الاهتمام بالفحص الظاهري للعينة حتي يمكن اخذ فكرة جيدةوكاملة عن العينة قبل عملية التحضير.
- يجب التأكد ان الميكروسكوب صالح للعمل من حيث سلامة ونظافةالعدسات ومن حيث الإضاءة والمسرح.
- التأكد من نظافة الشرائح الميكروسكوبية وكذلك غطاء الشرائح .
- أنيبدأ فحص العينة تحت الميكروسكوب بالعدسة الشيئية وقوة تكبير x 10 حتى يتممسح الشريحة كلها فإذا وجدت بويضات اشتبه فيها يتم الفحص بالعدسة الشيئية x 40
- بالنسبة للعينات التي تفحص للتأكد من وجود وحيداتالخلية بها Protozoa مثلالاميبا أو الجيارديا – لا مبليا يجب الفحص بالعدسةالشيئية ذات قوة التكبير x40 وذلكنظرا لصغر حجم وحيدات الخلية.
- في جميع الأحوال يجب أخذ اكثر من عينه من المريض ( ثلاثة عينات علي الأقل) وكذلكفحص اكثر من ( شريحة) من العينة وتختار من أماكن مختلفة حتى يمكن الحكمعلي نتيجة العينة جيدا.
تركيز الطفيليات في عينات البراز :
هناك عدة طرق لتركيز الطفيليات منهاعلى سبيل المثال:
1. طريقةمحلول صوديوم (ويليس):
تصلح لمعظم الطفيليات ما عدا الديدانالمفلطحة والبلهارسيا والفاشيولا وكذلك الديدان الأسطوانية.
2. طريقةالفورمول والأثير (MIF):
تصلح لمعظم الطفيليات ما عدا الأطوارالنشطة من الأميبا والجيارديا.
3. هارديأموري Harady Mori :
ليرقات الأسترنجلويدس.
4. طريقةكاتو Kato Tech. :
تصلح لبعض الطفيليات مثل الفاشيولاوالبلهارسيا المعوية وغيرها وتفيد في فحص البويضات المعوية ولكن لا تصلح معالأكياس أو اليرقات أو البويضات رقيقة الجدار مثل الأنكلستوما.
وبالطبع يتم اختبار الطريقة المناسبة تبعا للتجهيزات المتوفرة والوقت اللازم وكذلك نوع الطفيليات التي نبحث عنها.
وسنوجز الحديث هنا علي طريقتين لتركيزالبويضات ويرقات الطفيليات.
1. طريقةالفورمول والأثير لتركيز الطفيليات :
Formol Ether Concentration Tech.
الأدوات المطلوبة :
سنترفيوج كهربائي – أنابيب سنترفيوجبسدادة – زجاجات صغيرة – مخبار مدرج – قمع
المحاليل المطلوبة :
1. فورمالدهيد( فورمالين ) 50 مل + 450 مل ماء مقطر
2. أيثير.
3. محلولملح كلوريد الصوديوم ( فسيولوجي)
كيفية العمل :
1. يؤخذحوالي 2 مل من البراز في زجاجة صغيرة بسدادة وتمزج مع 10 مل محلول ملحي فسيولوجيوترج.
2. ترشحخلال طبقتين من الشاش في أنبوبة سنترفيوج حجم 10 مل.
3. تدارفي السنترفيوج الكهربائي لمدة دقيقة واحدة وإذا كان السائل العلوي عكرا يضاف 10 مل أخري من كلوريدالصوديوم الفسيولوجي أكثر من مرة وتدار لمدة دقيقة أخري حتى يصبح السائلالعلوي رائقا ويسكب الرائق ويترك الراسب في الأنبوبة.
4. يضاف10 مل من محلول الفورمالين إلي الراسب بالأنبوبة ويحرك ويمزج جيد ويترك لمدة 5دقائق.
5. يضاف3 مل من الأثير أو البنزين وتغلق الأنبوبة وترج بشدة لمدة 2/1 دقيقة ثم تدار فيالسنترفيوج لمدة دقيقة.
يتكون في الأنبوبة أربع طبقات
الطبقةالأولي : أيثير
الطبقة الثانية : فضلات
الطبقة الثالثة : محلول فورما لين
الطبقة الرابعة : الراسب محتوي علي الطفيليات
6. يتمالتخلص من الطبقات العلوية الثلاثة من الأنبوبة ويترك الراسب فقط ويمزج هذا الراسب جيدا.
7. تؤخذ نقطتين وتوضع علي شريحة بحيث توضع كل نقطة في مكان منفصل عن الآخر وتغطي النقطة الأولي بغطاء الشريحة أما الثانية فيضاف إليها نقطة محلول يود وتغطي بغطاء.
8. تفحص النقطة الأولي بالعدسة x10 ، x40 لجميع الطفيليات وتعد.
9. تفحص النقطة الثانية بالعدسة x10، x40 للبحث عن الأكياس وعددها.
ملحوظة:
يمكن شراء محلول MIF جاهزا للاستخدام بدلا من محلول الفورمالين والأيثير مع إجراءكل الخطوات بنفس الطريقة السابقة.
2. طريقةكاتو :
Kato Technique
تستخدم هذه الطريقة حاليا عل نطاقواسع في فحص عينات البراز للطفيليات المعوية وخصوصا بويضات الفشيولا والبلهارسيا المعوية وكذلك الهتروفيس وغيرها.
وللطريقة مزايا عديدة أهمها :
1- تستخدم للفحص وكذلك لعد البويضات لتقدير شدة الإصابة.
2- يمكنالاحتفاظ بالشرائح المصبوغة لمدة حوالي 6 شهور.
ومن عيوبها:
لا تصلح للكشف عن وحيدة الخلية أويرقات الاسترنجلويدس أو بويضات رقيقة
الجدار ، لذا يجب الفحص بطريقة اللطخةبالإضافة إلي كاتو لدقة الفحص.
1. الأدوات :
شرائح زجاجية – مربع كاتو – مصفاةكاتو – مراود بلاستيك – جفت صغير – سلوفان – صبغة ملاكيت جرين مخفف ومركز (أنظرجدول التحضيرات)
2. الطريقة
أ- تحضر شريحة نظيفة وترقم ويوضععليها مربع كاتو.
ب- توضع مصفاة فوق العينة ويؤخذ بطرفالمرود من علي المصفاة.
ج- توضع العينة التي بالمرود داخلمربع كاتو حتى يمتلئ الفراغ بالعينة.
د- يرفع المربع البلاستيك وتغطيالعينة بالسيلوفان المشبع وتفرد جيدا وتحضن علي 37 درجة أو في ضوء مباشر لمدة ساعتين ثم تفحص.
الفحص الظاهري:
- القوام :
القوام الطبيعي لعينة البراز متماسك (FORMED)
امااذا كان القوام لين أوإسهال (SOFT)
فهذايدل علي حالات غير طبيعية ويجب الاهتمام بالبحث عن السبب.
- اللون :
اللونالطبيعي لعينة البراز بني في الكبار وأصفر في الأطفال حديثي الولادة
أماإذا كان أخضر أو أسود مدمم فهذا يدل علي حالات غير طبيعية.
- الرائحة :
الرائحة المميزة للبراز رائحة برازيةولكن في بعض الحالات غير الطبيعية تكون رائحة البراز نفاذة وعفنة.
- مخاط وصديد ودم :
وجودالمخاط والصديد والدم والدهون بكثرة في البراز يعتبر غير طبيعي.
- طفيليات :
مثل ديدان الإسكارس والشريطيةوالاكسيورس.
الفحص الميكروسكوبي:
1- اللطخة (Direct Smear)
هذه الطريقة سهلة وسريعة وتستخدمأساسا لفحص أكياس الطفيليات ذات الخلية الواحدة مثل الاميبا وأكياسهاوالجيارديا – لامبليا وأكياسها
تتلخص خطوات هذه الطريقة كآلاتي :
- ضع قطعة صغيرة من البراز وبالذات الجزء الذب به دم أو مخاط ومنعلي السطح بواسطة مرود خشبي وأمزجها جيدا علي الشريحة بواسطة المرود.
- ضع غطاء الشريحة (Cover) وافحصالعينة تحت الميكروسكوب مستعملا العدسة الشيئية X 10 ثم بعد ذلك بالعدسة الشيئية X 40 محاولا العثور علي الطفيليات وحيدةالخلية ثم بعد ذلك ضع نقطة من محلول اليود المائي وذلك حتى يسهل التعرف علي أكياس الاميبا لأنها تأخذ لون اليود دون غيرها.
ملحوظة :
ضع محلول اليود المائي بهد الانتهاءمن الفحص الأولي بمحلول الملح لان
اليود يقتل الطفيليات وحيدة الخليةغير المتكيسة ( تروفوزنت ) .
2- الترسيب(Sedimentation)
وتستخدم هذه الطريقة لتحضير عيناتالبراز بغرض فحص الطفيليات التي تكون بويضاتها أثقل وزنا من محلول الملحالمخفف وبالتالي تترسب البويضات ، مثل بويضات الإسكارس الملقحة ، بويضاتالبلهارسيا بنوعيها ، يرقات سترنجلويدس وبويضات الفشيولا والهيمنولبس ناناودمنيوتا.
الخطوات :
- تؤخذ قطعة من البراز بحجم البندقية وتوضع في إناء زجاجي سعة 60مل يضاف محلول ملح الطعام المخفف ( 0.007%) إلي ربع الإناء.
- يقلب البراز في المحلول جيدا بواسطة مرود زجاجي.
- يصفي تلقائيا بمصفاة من سلك النحاس في كأس مخروطي.
- يترك الكأس هادئا لمدة 20 – 30 دقيقة.
- يفحص الراسب بواسطة أخذ جزء منه بواسطة ماصة ويوضع علي شريحةميكروسكوب وتغطي بغطاء الشريحة.
3-التعويم (Floatation)
وتستخدم هذه الطريقة لتحضير عيناتالبراز بغرض فحص الطفيليات التي تكون بويضاتها أخف وزنا من محلول الملحالمشبع وبالتالي تعوم البويضات علي السطح مثل بويضات الانكلوستوما ، الاكسيورس، الإسكارس غير الملقحة ، التينيا وبويضات التريكوكفلس ( تريكوريستريكيورا ) وبويضات الهتروفيس.
الخطوات :
- تؤخذ قطعة من البراز في حجم حبة الفول الصغيرة وتوضع في إناء من الزجاج سعة 60 مل مع قليل من الملح المشبع ( يحضر بإضافة واحد كيلو
جرام لكل 2 لتر ماء) بقدر ربع الإناء.
- تمزج قطعة البراز بواسطة مرود زجاجي.
- يصفي المحلول بمصفاة من سلك نحاسي معد لذلك – توضع المصفاة في القمع في فوهة القلماية ( دورق مخروطي ) .
- يكمل ملء القلماية الزجاجية بنفس محلول الملح حتى فوهتهاالعليا .
- توضع شريحة فوق فوهة القلماية.
- تترك لمدة 20 – 30 دقيقة ثم ترفع الشريحة باحتراس وتقلب وتوضعتحت الميكروسكوب.
4- مسحةشرجية لفحص الاكسيورس ( طريقة السيلوتيب)
The sellotape Swab For Enterobius Vermecularis
دودة الاكسيورس تعيش في الأمعاء الغليظة ، وتخرج أنثي الاكسيورس خارج فتحة الشرج ليلا وتضع بويضات الاكسيورس عليالجلد المحيط بفتحة الشرج ولهذا يتم عمل مسحة حتى يتم التقاط هذه البويضات.
وهناك أكثر من طريقة لعمل هذه المسحة وسوف نشرح اسهل هذه الطرق أكثرها شيوعا من الناحية العملية.
الطريقة :
- خذ قطعة من السيلوتيب الشفاف واثنيها علي طرف خافض لسان خشبيأو أنبوبة اختبار بحيث يكون سطحها اللاصق للخارج.
- ضع الخافض أو الأنبوبة بين فخذي الطفل بحيث يصل ألي منطقةالشرج فإذا وجدت بويضات الاكسيورس فسوف تلتصق علي السيلوتيب.
- الصق السيلوتيب علي شريحة ميكروسكوب ثم افحصها تحت الميكروسكوب.
- كن حريصا حتى لا تلوث يداك وذلك بلبس قفاز بلاستيك.
- بويضات الطفيليات الأكثر شيوعا والتي يمكن رؤيتها بالميكروسكوبسواء بصبغة أو بدون.
