ليثيوم ، الليثيوم Lithium

 ليثيوم ، الليثيوم Lithium

Flame photometer

يدخل عنصر الليثيوم في تركيب الادوية المعالجة للاكتئاب لما له من فعل مضاد لهذا المرض . وحيث إن هذا العنصر له تأثير سام على الكلى ويضعف وظيفة الغدة الدرقية ، ينصح المتناولين لهذه الأدوية بعمل تحاليل لقياس مستوى الليثيوم بالدم ولذلك أصبح هذه التحليل روتينياً في قسم الامراض النفسية .

وإذا كان هناك كسل بسيط في الكلى فعند تناول المستحضرات المحتوية على الليثيوم تتراكم كميات مضاعفة منه مؤدية إلى زيادة الخلل في الكلى .

و دم الانسان الطبيعي الذي لا يتناول هذه الادوية لا يحتوي على أي نسبة من عنصر الليثيوم ولكن هناك مستويات مختلفة منه عند متناولي مستحضرات الليثيوم تختلف من شخص إلى آخر وكل مستوى له دلالة اكلينيكية فمثلاً :

( 0.3 – 1.3 ملليمول / لتر ) هذا هو المعدل الطبيعي العلاجي Therapeutic Range

( 1.3 – 1.5 ملليمول / لتر ) معدل للتحذير من خطر الزيادة Warning Range

( 1.5 – 2.5 ملليمول / لتر ) تسمم بسيط Mild Toxicosis Range

( 2.5 – 3.5 ملليمول / لتر ) خطورة التسمم الشديد Severe Toxicosis Range

( أكثر من 3.5 ملليمول / لتر ) تسمم قد يودي بحياة المريض Fatal Range

ينصح بأخذ عينات الدم لهذا التحليل في الصباح بعد ( 12 + أو – نصف ساعة ) من رعة المساء نظراً لاختلاف مستوى الليثيوم في الدم من شخص إلى آخر على فترات اليوم وبتثبيت موعد أخذ العينات يكون هناك اقتراب مستوى الليثيوم في مختلف الأشخاص قدر الامكان .

يقاس عنصر الليثيوم باستخدام جهاز قياس الضوء اللهبي Flame Photometer وهذه هي الطريقة المثلى والمختارة ، لكن هناك عيباً لأن هذا الجهاز يقيس أيضاً عنصري الصوديوم والبوتاسيوم باستخدام الليثيوم كمحلول قياسي وهذا يؤثر على قياس الليثيوم إذا أجري تحليله بعد تحليل الصوديوم والبوتاسيوم ، وبالمثل فإن البوتاسيوم يستخدم كمحلول قياسي لقياس الليثيوم مما يؤثر على مستوى البوتاسيوم إذا قيس الصوديوم والبوتاسيوم بعد الليثيوم . ولذلك يجب أن تغسل أنابيب الجهاز جيدً بعد استخدام الجهاز لقياس أي منهما . ولكن يفضل أن يستخدم جهاز لقياس الصوديوم والبوتاسيوم وآخر لقياس الليثيوم وحده .

ديجوكسين ، الديجوكسين Digoxin

 ديجوكسين ، الديجوكسين Digoxin

Chemical structure of digoxin.gif

تحتوي نباتات عديدة على مواد لها تأثير شديد على انقباض عضلات القلب منها نباتات الفوكسجلاف Foxglove الذي تستخلص من أوراقه مركبات الديجيتاليس Digitalis ومن أهمها الديجوكسين Digoxin

يتم تناول الديجوكسين عادة عن طريق الفم ويحدث امتصاص لـ 60 – 80% منه في الأمعء ، ثم يخرج بدون تغير عن طريق الكلى ، ولذلك يؤخذ في الاعتبر وظيفة الكلى للمريض لتحديد الجرعة المطلوبة .

يعتبر الديجوكسين العلاج الأمثل لمرض فشل القلب الاحتقاني Congestive Heart Failure ويستخدم أيضاً لتنظيم ضربات القلب Antiarrhythmic

تُسحب عينة الدم الخاصة بالديجوكسين بعد 6 – 8 ساعات من آخذ آخر جرعة بالفم .

يترواح المستوى العلاجي لهذا الدواء ما بين 0.9 – 2 نانوجرام / ملليتراً .

تظهر أعرض السمومية في معظم المرضى البالغين بعد 2 نانوجرام/ملليتر ، ولكن في بعض المرضى تظهر هذه الاعراض ما بين 1.4 – 2 نانو جرام / ملليتر .

ومن هذه الأعراض زيادة انقباضات القلب ، وأكثر انتشاراً انقباضات البطين والاذين غير الكاملة Premature ومن أخطر مضاعفات الاعراض زيادة انقباضات البطين وارتعاشه Ventricular Fibrillation ، نقص البوتاسيوم في الدم ، وأمراض الرئة المزمنة .

فينيتوين ، الفينيتوين Phenytoin

فينيتوين ، الفينيتوين Phenytoin

 

يشبه الفينيتوين في تركيبه الفينوباربيتال ، ويستخدم في علاج التشنجات ، ولكنه لا يستخدم كمهديء ، ويستخدم هذا الدواء أيضاً في علاج زيادة ضربات القلب الناتجة عن التسمم بالديجوكسين ، ويستفاد منه ايضاً في علاج آلام الوجه Trigeminal Neuralgia ، وفي علاج الالآم العصبية المصاحبة لمرض البول السكري Diabetic Neuropathy .

يؤخذ عقار الفينيتوين عن طريق لفم ، ويمُتص ببطء في الأمعاء ، وبمجرد وصوله إلى الدم يدخل إلى الأنسجة لأنه قليل الذوبان في البلازما ، ولكنه يذوب في الدهون ، ويتخلص منه الجسم عن طريق التحول الكيميائي في الكبد ، وثم يخرج مع العصارة الصفراوية ، وتخرج كمية قليلة جداً منه عن طريق البول .

يتراوح المستوى العلاجي الطبيعي لهذا الدواء ما بين 10 – 20 ميكروجرام / ملليتر .

تبدأ اعراض التسمم بمستوى أعلى من 30 ميكروجرام / ملليتر .

أعراض التسمم بالفينيتوين هي الدوخة ، حركات الجسم والعين اللاإرادية ، الهلوسة ، نقص تكوين الدم ، تضخم اللثة ، لين العظام ، خلل الجهاز الليمفاوي ، و التهاب الكبد .

حمض الفالبوريك Valporic Acid أو حمض الفالبرويك Valproic acid

 حمض الفالبوريك Valporic Acid أو حمض الفالبرويك Valproic acid

Chemical structure of valproic.gif

يستخدم هذا الدواء مع ما سبق ذكره من أدوية في علاج الصرع ، ويعتبر أحدث الأدوية في علاج التشنجات .

يؤخذ هذا الدواء عن طريق الفم ، ويتم امتصاصه كاملاً وبسرعة ، ثم يتم أيضه في الكبد بارتباطه مع حمض الجلوكورونيك Glucorunic Acid ثم يخرج مع البول .

يتراوح المستوى العلاجي لهذا الدواء ما بين 50 – 100 ميكروجرام / ملليتراً .

تظهر أعراض السمومية عندما يزيد تركيز الدواء على 100 ميكروجرام / ملليتراً .

ومن اعراضه الجانبية الغثيان ، القيء ، فشل الكبد ، و نقص الصفائح الدموية .

الصورة التي يحلل بها الدم

 الصورة التي يحلل بها الدم

بعد عملية السحب تأتي مجموعة من التعليمات التي يجب اتباعها بدقة لغرض حفظ العينة من التلف وتهيئتها لتلائم نوعية الاختبار الذي سنقوم به وبصورة عامة فإنه لابد أن تكون المحقنة والأنابيب المستخدمة نظيفة خالية من أي مواد كيميائية أو شوائب ولا يشترط أن تكون معقمة . 

1) السيرم ( مصل الدم ) Serum

للحصول على السيرم يتم نقل الدم المسحوب من المحقنة إلى أنبوبة الاختبار ثم يترك الدم لمدة تتراوح من 10 – 20 دقيقة في درجة حرارة الغرفة ويمكن أن تترك الأنبوبة لمدة أطول تصل إلى نصف ساعة إذا وضعت الأنبوبة في الثلاجة ، ويجب عدم تحريك الأنبوبة منعاً لتحلل الدم Hemolysis، وبعد وصول عينة الدم إلى التخثر التام تحرك العينة بعود خشبية بلطف حول الجزء العلوي من المادة المتخثرة اللاصقة على جدران الأنبوبة من الداخل ويجب تجنب التحريك السريع منعاً لتعلل الدم ثم بعد ذلك توضع عينة الدم في جهاز الطرد المركزي فتترسب الجلطة وتكون الطبقة العليا هي السيرم ولونه الطبيعي أصفر

هناك طريقة أخرى تستعمل في بعض المختبرات لفصل السيرم وهي استخدام أنابيب خاصة مفرغة من الهواء تسمى Vacutainer حاوية على عنصر السيليكون وبعض منها يكون مضاف إليها الهلام Gel لغرض التقليل من عملية التحلل الدموي ومنع المادة المتخثرة من الالتصاق على جدران الأنبوبة وفصل أكبر كمية ممكنة من السيرم للأنبوبة المضاف إليها الهلام ، وتفصل المادة المتخثرة عن السيرم باستخدام عملية الطرد المركزي Centrifuge التي تؤدي إلى ترسب المادة المتخثرة في أسفل الأنبوبة ويبقى السيرم في الجزء العلوي من الأنبوبة مباشرة وبعد الانتهاء من عملية الطرد المركزي نقوم بنقل السيرم مباشرة بماصة بلاستيكية إلى انبوبة نظيفة وجافة برفق ويتم معاملة السيرم بعد ذلك على حسب نوعية الاختبار فقد تسمح ظروف التجربة أن يبقى السيرم في درجة حرارة الغرفة أو يحفظ في الثلاجة عند درجة حرارة مناسبة أو عند درجة التجمد أو يتطلب عمل الاختبار مباشرة بعد فصل السيرم (الفرق بين عينة السيرم والبلازما هو أن عينة السيرم لا تحتوي على مواد مانعة للتخثر Anticoagulants

الدم الكلي Whole Blood

يستخدم الدم الكلي لقياس تركيز سكر الجلوكوز (وهي الطريقة المتبعة في المستشفيات) ويجب إجراء التحليل مباشرة بعد استلامه من قبل فني المختبر بعد التأكد من إضافة فلوريد البوتاسيوم إلى الأنبوبة الخاصة بجمع عينة السكر (لمنع عملية تحلل الجلوكوز Glycolysis ) وهذه العملية مهمة جداً خاصة إذا كان هناك فترة زمنية لمدة ساعة أو أكثر من أخذ العينة وإيصالها إلى المختبر والقيام بالتحليل . ويجب التأكيد محلى سرعة استخلاص أو فصل السيرم أو البلازما من الجلطة أو من الخلايا مباشرة بعد تجميع عينات الدم حيث أن الجلوكوز يتغير بسرعة أكبر من المركبات الكيميائية العادية الأخرى خاصة عندما يترك على اتصال ملامس للخلايا حيث تقوم البكتيريا بتحلل الجلوكوز مما يؤدي إلى انخفاض قيمته الحقيقية المقاسة . 

البلازما Plasma

يتم الحصول على البلازما بسحب الدم من وريد الساعد بواسطة محقنة معقمة وجافة تستعمل مرة واحدة وينقل الدم إلى أنبوب جاف فيه مادة مانعة للتخثر مثل هيبارين الصوديوم 1% ومن ثم يقلب الأنبوب بهدوء رأساً على عقب عدة مرات ليمزج الدم جيدا بمانع التخثر ثم ينقل الدم فورا ليفصل بجهاز الطرد المركزي ويكون الجزء العلوي هو البلازما وبعد ذلك يتم نقل البلازما إلى أنبوبة نظيفة لإجراء الاختبارات المطلوبة عليها . 

وهناك إجماع عام في معظم المختبرات على تفضيل استخدام السيرم بدلاً من البلازما أو الدم الكلي وذلك لسهولة تحضيره والحصول عليه إضافة إلى أن تغير ثبات الجلوكوز في السيرم في درجة حرارة الغرفة أقل بكثير من تغير ثباته في الدم الكلي وكذلك معظم الإنزيمات تثبت فيه لمدة 24 ساعة على الأقل إذا ما بردت في الثلاجة ولمدة أطول في المجمدة . وإذا استعرضنا بقية مكونات الدم فنجد أن الأيونات اللاعضوية ثابتة في السيرم لمدة تقارب 8 ساعات في درجة حرارة الغرفة ولعدة أيام في درجة حرارة الثلاجة كما أن كل من اليوريا والكرياتينين وحامض البوليك تكون ثابتة لمدة 42 ساعة على الأقل بدون ثلاجة ولمدة أطول تحت تبريد الثلاجة أما البيليروبين (خاصة غير المقترن) فهو حساس جداً للضوء لذلك يجب أن يفحص فوراً أو يحمى من الضوء المباشر بحفظه في مكان مظلم .

هناك عدة نقاط تحدد اختيار عينة الدم هل ما نحتاجه في التحليل عينة دم كلي أو سيرم أو بلازما وهي : 

1 - يفضل استعمال الدم الكلي في أكثر التحاليل حيث يمكن الاستفادة من كميات قليلة منه لإجراء الفحص دون الحاجة إلى عزل كريات الدم مما يتطلب عند ذلك كميات لحبر ويستعمل الدم الكلي بصورة خاصة لقياس المواد التي تكون موزعة بصورة متقاربة بين البلازما والخلايا مثل السكر واليوريا . 

2 - توجد داخل الكريات الحمراء مواد تتداخل مع التفاعلات التي تجرى لقياس بعض مكونات الدم كحامض البوليك أو الكرياتينين وعندها يجب استعمال السيرم أو البلازما وكذلك يستعمل السيرم أو البلازما لقياس بعض المكونات التي تختلف في تركيزها بين الخلايا والبلازما مثال ذلك أيون البوتاسيوم حيث يكون تركيزه في البلازما أقل بكثير من تركيزه في داخل الكريات والعكس بالنسبة للصوديوم .

3 - يفضل استعمال السيرم على البلازما تجنبا للتداخل الذي قد يحدث نتيجة استعمال المواد المانعة للتخثر ومن أمثلة ذلك تأثير مانعات التجلط على فعالية الإنزيمات ، وكذلك يفضل استعمال البلازما في بعض الفحوص التي تتطلب عزل الكريات عن البلازما بأسرع ما يمكن فمثلا يزداد تركيز الفوسفات العضوية في البلازما نتيجة تسربها من الكريات الحمراء عند ترك الدم ولو لفترة وجيزة ، كما أن تحلل الفوسفات العضوية إلى الفوسفات الغير عضوية بسبب فعالية إنزيمات الفوسفاتاز يزيد في تركيز الفوسفات غير العضوية في البلازما دون الحاجة إلى انتظار تحلل تجلط الدم (كما في السيرم) .

ملحوظة هامة : 

لابد أن يكون لون السيرم أو البلازما أصفراً صافياً ولا يوجد فيه أي عكارة وإذا وجد اللون مبيضاً فإنه يدل على ارتفاع نسبة الدهون فيه مما يؤثر على نتيجة التحليل وبالمثل إذا كان اللون محمراً فانه يدل على تكسر كريات الدم الحمراء الذي يؤثر تأثيرا كبيراً على بعض النتائج وإذا كان لونه أصفر مخضراً فإنه يدل على زيادة نسبة البيليروبين بالدم .

فحص وظائف الكبد

 فحص وظائف الكبد

Liver Function Tests

يتم تقسيم وظائف الكبد إلى ثلاث وظائف رئيسية :

1-  وظائف تعتمد على قدرة الكبد التصنيعية مثل البروتين الكلي والالبيومين .

2- وظائف تعتمد على سلامة خلايا الكبد ، وتسمى بانزيمات الكبد وهي الانزيمات الموجودة داخل خلايا الكبد مثل اسبرتات امينو ترانسفيراز ، و انزيم الانين امينو ترانسفيراز ، و انزيم جاما . ج ت ، و انزيم نازعة الهيدروجين من لاكتات .

3- وظائف تعتمد على القدرة الاستخراجية للكبد ، مثل الفوسفاتاز القلوي ، و البيليروبين .

أولآ:  وظائف تعتمد على القدرة التصنيعية للكبد :

(أ) البروتين الكلي في البلازما :

يتحكم تركيز البروتين في تحديد الضغط الاسموزي للبلازما ، ويتأثر هذا التركيز بالحالة الغذائية ووظيفة الكبد ، و وظيفة الكلى وحدوث بعض الامراض مثل الخلل في التمثيل الغذائي .

إن التغيرات في أجزاء البروتين الكُلي يمكن أن تحدد نوع المرض .

ويشمل البروتين الكلي في البلازما الالبيومين و الجلوبيولين و الفيبرينوجين و لكن يفتقر السيرم إلى الفيبرينوجين حيث يدخل في عملية تجلط الدم .

مستوى البروتين في الدم يتراوح ما بين 6 - 8 جم لكل 100 ملليتر دم ( 60 - 80 جم / لتر ).

يختلف تركيز البروتين باختلاف تركيز مكوناته المناظرة .

(ب) الالبيومين :

يعتبر الالبيومين المكون الرئيس للبروتين الكُلي ويتم تصنيعه في الكبد .

مستوى الالبيومين في الدم يتراوح ما بين 3.5 - 5.5 جم / 100 ملليتر دم ( 35 - 55 جم / لتر ) .

اسباب ارتفاع مستوى الالبيومين في الدم :

يرتفع مستوى الالبيومين في الدم الحالات التالية

- حالات التجفاف ، وذلك لفقد كمية من السوائل مثل ما يحدث في القيء المستمر والاسهال الشديد .

- الصدمة العصبية .

- تركيز الدم .

- حقن كمية كبيرة من الالبيومين عن طريق الوريد .

اسباب نقصان تريكز الالبيومين في الدم :

- سوء التغذية .

- امراض سوء الامتصاص .

- التهابات الكلى الحادة والمزمنة .

- كسل الكبد الحاد و المزمن .

- الحروق .

- احتشاء عضلة القلب .

(ج) الجلوبيولين :

يعتبر الجلوبيولين ثاني مكونات البروتين ، ويشمل الاجزاء التالية : الالفا و البيتا ، ويتم تصنيعهما بواسطة الكبد ، واخيرآ الجاما ويتم تصنيعه بواسطة خلايا البلازما الموجودة في الانسجة الليمفاوية ويعتبر هذ النوع المسؤول الاول عن ارتفاع الجلوبيولين في الدم لأنه يكوّن الاجزء الأكبر من الجلوبيولين .

إن مستوى الجلوبيولين في الدم يتراوح ما بين 2 - 3.6 جم / 100 ملليتر دم ( 20 - 36 جم / لتر ) .

اسباب زيادة تركيز الجلوبيولين :

يزداد تركيز الجلوبيولين في الدم في :

- امراض الكبد والتهاب الكلد الوبائي

- امراض الجهاز الليمفاوي

- امراض الجهاز المناعي والامراض المعدية الحادة والمزمنة

- حالات الإصابة بالبلهارسيا والملاريا والليشمانيا .

اسباب قلة تركيز الجلوبيولين :

يقل مستوى الجلوبيولين في الدم في :

- امراض سوء التغذية

- افتقار الجامل جلوبيولين الوراثية

- نقصان الجاما جلوبيولين المكتسبة

- امراض سرطان الدم الليمفاوية

 (د) الفيبرينوجين :

يتكون الفيبرينوجين في الكبد ويعتبر من أهم العوامل اللازمة لعملية تجلط الدم حيث يتحول إلى الفيبرين وهو شبكة الجلطة الاخيرة .

ويتم قياسه فقط في البلازما حيث لا يحدث تجلط عكس ما يحدث في الحصول على السيرم الذي لا يحتوي على الفيبرينوجين .

مستوى الفيبرينوجين في البلازما يتراوح ما بين 0.2 - 0.6 جم / 100 ملليتر دم ( 2 - 6 جم / ليتر ) .

اسباب زيادة نسبة الفيبرينوجين :

ترتفع نسبة الفيبرينوجين في الدم في :

- امراض و التهابات الكلى

- الامراض المعدية

- الالتهابات الحادة

اسباب نقصان نسبة الفيبرينوجين في الدم :

يقل مستوى الفيبرينوجين في الدم في :

- حالات التجلط المنتشر داخل الاوعية الدموية مثل حالات موت الجنين داخل الرحم لفترة أطول من شهر

- الالتهاب السحائي

- كسل الكبد الحاد والمزمن

- نقص الفيبرينوجين الوراثي

- مرض التيفوئيد

ملحوظة: نظرآ لثبات مستوى البروتين الكُلي مع اختلاف مستوى مكوناته يتم حساب نسبة ( معدل ) الالبيومين للجلوبيولين كالاتي :

نسبة الالبيومين للجلوبيولين =  مستوى الالبيومين

  مستوى الجلوبيولين

                 =                         مستوى الالبيومين في البلازما                            

                    مستوى البروتين في البلازما - ( مستوى الالبيومين + مستوى الفيبرينوجين )

                 =                         مستوى الالبيومين في السيرم                            

                    مستوى البروتين في السيرم -  مستوى الالبيومين في السيرم

وتتراوح نسبته الطبيعية ما بين

2      إلى 1

1 1

وترتفع هذه النسبة في الحالات المصاحبة لارتفاع مستوى الالبيومين أو الحالات المصاحبة لنقص الجلوبيولين أو الحالتين معآ .

وتقل نسبة ( معدل ) A/G في الحالات المصاحبة لانخفاض مستوى الالبيومين أو ارتفاع مستوى الجلوبيولين أو كليهما معآ .

(2) وظائف تعتمد على سلامة خلايا الكبد :

يوجد بداخل خلايا الكبد بعض الإنزيمات مثل ( Y.GT) و ( ALT/GPT) و ( AST/GOT) ولذلك تسمى هذه الوظائف بإنزيمات الكبد .

اسباب ارتفاع ( زيادة ) مستوى انزيمات الكبد في الدم :

ترتفع مستويات أنزيمات الكبد في الدم في الامراض المصاحبة لتلف وتكسير خلايا الكبد وخلايا الانسجة الاخرى التي توجد بداخلها

(أ) انزيم أسبرتات أمينو ترانسفيراز ( AST/GOT) و إنزيم الانين امينو تراسفيراز ( ALT/GPT)

تنشأ هذه الانزيمات من أنسجة عديدة خاصة الكبد والقلب و العضلات .

يتراوح المستوى الطبيعي لـ ( GPT) من صفر إلى 45 وحدة دولية / لتر .

يتراوح نسبة (GOT) من صفر إلى 41 وحدة دولية / لتر .

يرتفع مستوى هذه الأنزيمات في التهاب و تليف الكبد .

يرتفع ( GPT) في الحالات الحادة حيث يوجد في السيتوبلازم ثم يليه الـ ( GOT) الذي يوجد في الميتوكوندريا و السيتوبلازم ، ولذلك يكون أكثر ارتفاعآ في الحالات المزمنة  و احتشاء عضلة القلب ، وترتفع نسبة الـ ( GOT) كذلك في حالات ضمور العضلات والتهابها .

يقل مستوى هذه الإنزيمات في حالات نقص فيتامين " ب 6 " و الفشل الكلوي و أثناء الحمل .

(ب) انزيم جاما . ج ت ( Y - GT) :

يوجد هذا الانزيم في خلايا الكبد و الكلى و البنكرياس

النسبة الطبيعية لهذا الانزيم في الدم أقل من 30 مل وحدة دولية لكل ملليتر دم في الذكور

وأقل من 25 مل وحدة دولية لكل ملليتر دم في الاناث

وأقل من 50مل مل وحدة دولية لكل ملليتر دم في فترة البلوغ .

ترتفع هذه النسبة في :-

- امراض الكبد المختلفة الحادة والمزمنة و تليف الكبد و سرطان الكبد

- امراض الكبد الناتجة عن تناول الكحول

- التهاب البنكرياس (نادرآ)

(3) وظائف تعتمد على القدرة الإستخراجية للكبد :

(أ) أنزيم الفوسفاتاز القلوي (ALP)

ينشأ انزيم الفوسفاتاز القلوي من العظام ويوجد بكثرة في العظام خاصة اثناء النمو ويوجد ايضآ بالكبد و المشيمة و الامعاء، وفي السيرم يكون هذا الإنزيم خليط من أماكن نشأته وهذا مايسمى بـ " شبيهات الانزيم " التي يمكن تمييزها بالفصل الكهربائي .

ومن مسمى هذا الأنزيم نستنتج أنه يقوم بوظيفته في وسط قلوي حيث إن الأس الهيدروجيني (PH) أكثر من 7

إن مستوى هذا الانزيم الطبيعي بالدم يختلف بإختلاف الطريقة المستخدمة لقياسه ، ولكن عامة يتراوح ما بين 24 - 71 وحدة دولية / لتر دم وذلك عند درجة حرارة (30 م) ، وفي الاطفال في سن النمو ترتفع هذه النسبة حتى 350 وحدة دولية / لتر

اسباب ارتفاع تركيز انزيم الفوسفاتاز القلوي :

يرتفع تركيز الانزيم في الحالات التالية:-

-  في الاطفال أثناء النمو الطبيعي للعظام ، وهذا ما يسمى بـ الارتفاع الفيسيولوجي للأنزيم .

- امراض نمو العظام مثل حالات فرط وظيفة الغدة جار الدرقية ، و الكساح في الاطفال و لين العظام في الكبار و تكلسم العظم

- انسداد القنوات الكبدية و المرارية التي تحدث نتيجة لحصوات مرارية أو ضيق او ورم سرطاني

- امراض الكبد خاصة الالتهاب الكبدي الوبائي أو تسمم الكبد ببعض الادوية مثل الكلوربرومازين و ميثيل التستستيرون .

- اثناء الحمل ، ويعتبر مثال أيضآ لـ الارتفاع الفسيولوجي للانزيم

- فرط نشاط الغدة الدرقية

يقل مستوى الانزيم في :

- حالات قصور وظيفة الغدة جار الدرقية

- اثناء وقف نمو الطفل

(ب) البيليروبين :

ينتج البيليروبين من هدم الهيموجلوبين بعد تكسر كريات الدم الحمراء وذلك في نهاية فترة حياتها ، ثم يرتبط مع حمض الجلوكورونيك في الكبد ليتحول إلى ثنائي جلوكورونات البيليروبين القابل للذوبان في الماء ثم يخرج عن طريق الكبد مع الصفراء في القنوات المرارية، ولذلك يوجد نوعان من البيليروبين هما البيليروبين غير المباشر ( ID - BIL ) وهو ما قبل الارتباط وغير قابل للذوبان في الماء ، والبيليروبين المباشر ( D - BIL ) وهو ما بعد الارتباط وهو قابل للذوبان في الماء .

مجموع النوعين يطلق عليه البيليروبين الكُلي ( T- BIL )

يتراوح المستوى الطبيعي لـ البيليروبين الكُلي ما بين 3.5 - 19 ميكرومول / لترآ

يصل المستوى الطبيعي لـ البيليروبين المباشر إلى 7 ميكرومول / لترآ.

اسباب زيادة او ارتفاع البيليروبين عن المستوى الطبيعي :-

يزداد مستوى البيليروبين في ثلاث حالات مختلفة :

- امراض الكبد المؤدية إلى عدم قدرته الكافية على ارتباط واستخراج البيليروبين ويؤدي ذلك إلى ارتفاع البيليروبين المباشر وغير المباشر ، ويسمى هذا النوع بـ " الصفراء الخلوية الكبدية " .

- انسداد القنوات المرارية ، مما يؤدي إلى استرجاع البيليروبين المباشر إلى الكبد ومنه إلى الدم مما يؤدي إلى ارتفاع هذا النوع من البيليروبين ويسمى هذا المرض بـ " الصفراء الانسدادية "

- تكسر كريات الدم الحمراء أكثر من قدرة الكبد على ارتباط البيليروبين مما يؤدي إلى زيادة البيليروبين غير المباشر في الدم ، ويحدث ذلك في الأمراض المؤدية إلى تكسر كريات الدم الحمراء ، ويسمى هذ النوع ب، " صفراء تكسر كريات الدم الحمراء " ، ويحدث هذا النوع أيضآ في الاطفال حديثي الولادة نتيجة لنقص  نشاط أو غياب نشاطية الانزيم الخاص بعملية الاربتاط ، ويسمى هذا النوع " الصفراء الطبيعية الوليدية " أو " يرقان حديثو الولادة " وتحدث في الأسبوع الاول بعد الولادة .

ملاحظات :

- الارتفاع المضطرد في البيليروبين المباشر وكذلك الفوسفاتاز القلوي وبنفس النسبة يشير إلى إنسداد القنوات الصفراوية وذكلك إلتهاب القنوات الصفراوية .

- الإرتفاع في البيليروبين يكون اكثر من الارتفاع في الفوسفاتاز القلوي في التهاب الكبد الوبائي وكذلك تكسرالدم .

الكلمات والمصطلحات

 الكلمات والمصطلحات 

القدرة التصنيعية Synthetic Functions

البروتين الكلي ( Total Protein - Tp)

الألبيومين ( Albumin - Alb)

انزيمات الكبد Liver Enzymes

أسبرتات أمينو ترانسفيراز Aspartate Aminotransferase AST (GOT)

إنزيم الأنين أمينو ترانسفيراز Alanine Aminotransferase ALT( GPT)

انزيم جاما . ج ت Gamma Glutamyl Transferase ( y.GT)

انزيم نازعة الهيدروجين من لاكتات LDH

القدرة الاستخراجية Excretory Function

الفوسفاتوز القلوي Alkaline Phosphatase -Alp

البيليروبين Bilirubin

الضغط الأسموزي Colloidal Osmotic Pressure

الخلل في التمثيل الغذائي Metabolic Error

الجلوبيولين Globulin

الفيبرينوجين Fibrinogen

التجفاف Dehydration

تركيز الدم Haemoconcentraion

الفا جلوبيولين a1 & a2 Globulin

بتيا جلوبيولين B-Globulin

جاما جلوبيولين Y-Globulin

خلايا البلازما Plasma Cells

الفيبرين Fibrin

معدل الالبيومين للجلوبيولين Albumin / Globulin Ratio (A/G%)

احتشاء عضلة القلب Myocardial Infarction

شبيهات الانزيم Isoenzymes

فرط وظيفة الغدة جار الدرقية Hyperparathyroidism

تكلسم العظام Ossification

الكلوربرومازين Chlorpromazine

ميثيل التيستستيرون Methyl Testosterone

قصور وظيفة الغدة جار الدرقية Hypoparathyroidism

وقف نمو الطفل Growth Retardation

حمض الجلوكورونيك Glucorunic Acid

البيليروبين غير المباشر Indirect Bilirubin (ID - BIL )

البيليروبين المباشر Direct Bilirubin (D - BIL )

البيليروبين الكُلي Total Bilirubin (T - BIL )

الصفراء الخلوية الكبدية Hepatocellular Jaundice

الصفراء الانسدادية Obstructive Jaundice

صفراء تكسر كريات الدم الحمراء Haemolytic Jaundice

يرقان حديث الولادة Physiological Neonatal Jaundice

فحوصات وظائف الكبد Liver Function Tests

فحص البراز Stool Examination

 فحص البراز Stool Examination

 

طريقة اجراء تحليل البراز بالتفصيل

 

يجب مراعاة آلاتي :

- يجب اخذ عينة البراز في وعاء بلاستيك نظيف بغطاء.

- يجب وضع بيانات صاحب العينة علي الوعاء.

- يجب التنبيه علي صاحب العينة بعدم خلط عينة البراز بمواد أخريمثل البول.

- يجب فحص العينة فور أخذها.

- ضرورة الاهتمام بالفحص الظاهري للعينة حتي يمكن اخذ فكرة جيدةوكاملة عن العينة قبل عملية التحضير.

- يجب التأكد ان الميكروسكوب صالح للعمل من حيث سلامة ونظافةالعدسات ومن حيث الإضاءة والمسرح.

- التأكد من نظافة الشرائح الميكروسكوبية وكذلك غطاء الشرائح .

- أنيبدأ فحص العينة تحت الميكروسكوب بالعدسة الشيئية وقوة تكبير x 10 حتى يتممسح الشريحة كلها فإذا وجدت بويضات اشتبه فيها يتم الفحص بالعدسة الشيئية x 40

- بالنسبة للعينات التي تفحص للتأكد من وجود وحيداتالخلية بها Protozoa مثلالاميبا أو الجيارديا – لا مبليا يجب الفحص بالعدسةالشيئية ذات قوة التكبير x40 وذلكنظرا لصغر حجم وحيدات الخلية.

- في جميع الأحوال يجب أخذ اكثر من عينه من المريض ( ثلاثة عينات علي الأقل) وكذلكفحص اكثر من ( شريحة) من العينة وتختار من أماكن مختلفة حتى يمكن الحكمعلي نتيجة العينة جيدا.

تركيز الطفيليات في عينات البراز :

 

هناك عدة طرق لتركيز الطفيليات منهاعلى سبيل المثال:

1. طريقةمحلول صوديوم (ويليس):

 

تصلح لمعظم الطفيليات ما عدا الديدانالمفلطحة والبلهارسيا والفاشيولا وكذلك الديدان الأسطوانية.

2. طريقةالفورمول والأثير (MIF):

 

تصلح لمعظم الطفيليات ما عدا الأطوارالنشطة من الأميبا والجيارديا.

3. هارديأموري Harady Mori :

 

ليرقات الأسترنجلويدس.

4. طريقةكاتو Kato Tech. :

 

تصلح لبعض الطفيليات مثل الفاشيولاوالبلهارسيا المعوية وغيرها وتفيد في فحص البويضات المعوية ولكن لا تصلح معالأكياس أو اليرقات أو البويضات رقيقة الجدار مثل الأنكلستوما.

وبالطبع يتم اختبار الطريقة المناسبة تبعا للتجهيزات المتوفرة والوقت اللازم وكذلك نوع الطفيليات التي نبحث عنها.

 

وسنوجز الحديث هنا علي طريقتين لتركيزالبويضات ويرقات الطفيليات.

1. طريقةالفورمول والأثير لتركيز الطفيليات :

Formol Ether Concentration Tech.

 

الأدوات المطلوبة :

 

سنترفيوج كهربائي – أنابيب سنترفيوجبسدادة – زجاجات صغيرة – مخبار مدرج – قمع

المحاليل المطلوبة :

 

1. فورمالدهيد( فورمالين ) 50 مل + 450 مل ماء مقطر

2. أيثير.

3. محلولملح كلوريد الصوديوم ( فسيولوجي)

كيفية العمل :

 

1. يؤخذحوالي 2 مل من البراز في زجاجة صغيرة بسدادة وتمزج مع 10 مل محلول ملحي فسيولوجيوترج.

2. ترشحخلال طبقتين من الشاش في أنبوبة سنترفيوج حجم 10 مل.

3. تدارفي السنترفيوج الكهربائي لمدة دقيقة واحدة وإذا كان السائل العلوي عكرا يضاف 10 مل أخري من كلوريدالصوديوم الفسيولوجي أكثر من مرة وتدار لمدة دقيقة أخري حتى يصبح السائلالعلوي رائقا ويسكب الرائق ويترك الراسب في الأنبوبة.

4. يضاف10 مل من محلول الفورمالين إلي الراسب بالأنبوبة ويحرك ويمزج جيد ويترك لمدة 5دقائق.

5. يضاف3 مل من الأثير أو البنزين وتغلق الأنبوبة وترج بشدة لمدة 2/1 دقيقة ثم تدار فيالسنترفيوج لمدة دقيقة.

يتكون في الأنبوبة أربع طبقات

 

الطبقةالأولي : أيثير

الطبقة الثانية : فضلات

الطبقة الثالثة : محلول فورما لين

الطبقة الرابعة : الراسب محتوي علي الطفيليات

6. يتمالتخلص من الطبقات العلوية الثلاثة من الأنبوبة ويترك الراسب فقط ويمزج هذا الراسب جيدا.

7. تؤخذ نقطتين وتوضع علي شريحة بحيث توضع كل نقطة في مكان منفصل عن الآخر وتغطي النقطة الأولي بغطاء الشريحة أما الثانية فيضاف إليها نقطة محلول يود وتغطي بغطاء.

8. تفحص النقطة الأولي بالعدسة x10 ، x40 لجميع الطفيليات وتعد.

9. تفحص النقطة الثانية بالعدسة x10، x40 للبحث عن الأكياس وعددها.

ملحوظة:

يمكن شراء محلول MIF جاهزا للاستخدام بدلا من محلول الفورمالين والأيثير مع إجراءكل الخطوات بنفس الطريقة السابقة.

 

2. طريقةكاتو :

Kato Technique

 

تستخدم هذه الطريقة حاليا عل نطاقواسع في فحص عينات البراز للطفيليات المعوية وخصوصا بويضات الفشيولا والبلهارسيا المعوية وكذلك الهتروفيس وغيرها.

وللطريقة مزايا عديدة أهمها :

 

1- تستخدم للفحص وكذلك لعد البويضات لتقدير شدة الإصابة.

2- يمكنالاحتفاظ بالشرائح المصبوغة لمدة حوالي 6 شهور.

ومن عيوبها:

لا تصلح للكشف عن وحيدة الخلية أويرقات الاسترنجلويدس أو بويضات رقيقة

الجدار ، لذا يجب الفحص بطريقة اللطخةبالإضافة إلي كاتو لدقة الفحص.

1. الأدوات :

 

شرائح زجاجية – مربع كاتو – مصفاةكاتو – مراود بلاستيك – جفت صغير – سلوفان – صبغة ملاكيت جرين مخفف ومركز (أنظرجدول التحضيرات)

2. الطريقة

 

أ- تحضر شريحة نظيفة وترقم ويوضععليها مربع كاتو.

ب- توضع مصفاة فوق العينة ويؤخذ بطرفالمرود من علي المصفاة.

ج- توضع العينة التي بالمرود داخلمربع كاتو حتى يمتلئ الفراغ بالعينة.

د- يرفع المربع البلاستيك وتغطيالعينة بالسيلوفان المشبع وتفرد جيدا وتحضن علي 37 درجة أو في ضوء مباشر لمدة ساعتين ثم تفحص.

 

الفحص الظاهري:

 

- القوام :

 

القوام الطبيعي لعينة البراز متماسك (FORMED)

امااذا كان القوام لين أوإسهال (SOFT)

فهذايدل علي حالات غير طبيعية ويجب الاهتمام بالبحث عن السبب.

- اللون :

 

اللونالطبيعي لعينة البراز بني في الكبار وأصفر في الأطفال حديثي الولادة

أماإذا كان أخضر أو أسود مدمم فهذا يدل علي حالات غير طبيعية.

- الرائحة :

 

الرائحة المميزة للبراز رائحة برازيةولكن في بعض الحالات غير الطبيعية تكون رائحة البراز نفاذة وعفنة.

- مخاط وصديد ودم :

 

وجودالمخاط والصديد والدم والدهون بكثرة في البراز يعتبر غير طبيعي.

- طفيليات :

 

مثل ديدان الإسكارس والشريطيةوالاكسيورس.

 

الفحص الميكروسكوبي:

 

1- اللطخة (Direct Smear)

 

هذه الطريقة سهلة وسريعة وتستخدمأساسا لفحص أكياس الطفيليات ذات الخلية الواحدة مثل الاميبا وأكياسهاوالجيارديا – لامبليا وأكياسها

تتلخص خطوات هذه الطريقة كآلاتي :

 

- ضع قطعة صغيرة من البراز وبالذات الجزء الذب به دم أو مخاط ومنعلي السطح بواسطة مرود خشبي وأمزجها جيدا علي الشريحة بواسطة المرود.

- ضع غطاء الشريحة (Cover) وافحصالعينة تحت الميكروسكوب مستعملا العدسة الشيئية X 10 ثم بعد ذلك بالعدسة الشيئية X 40 محاولا العثور علي الطفيليات وحيدةالخلية ثم بعد ذلك ضع نقطة من محلول اليود المائي وذلك حتى يسهل التعرف علي أكياس الاميبا لأنها تأخذ لون اليود دون غيرها.

ملحوظة :

ضع محلول اليود المائي بهد الانتهاءمن الفحص الأولي بمحلول الملح لان

اليود يقتل الطفيليات وحيدة الخليةغير المتكيسة ( تروفوزنت ) .

 

2- الترسيب(Sedimentation)

 

وتستخدم هذه الطريقة لتحضير عيناتالبراز بغرض فحص الطفيليات التي تكون بويضاتها أثقل وزنا من محلول الملحالمخفف وبالتالي تترسب البويضات ، مثل بويضات الإسكارس الملقحة ، بويضاتالبلهارسيا بنوعيها ، يرقات سترنجلويدس وبويضات الفشيولا والهيمنولبس ناناودمنيوتا.

الخطوات :

 

- تؤخذ قطعة من البراز بحجم البندقية وتوضع في إناء زجاجي سعة 60مل يضاف محلول ملح الطعام المخفف ( 0.007%) إلي ربع الإناء.

- يقلب البراز في المحلول جيدا بواسطة مرود زجاجي.

- يصفي تلقائيا بمصفاة من سلك النحاس في كأس مخروطي.

- يترك الكأس هادئا لمدة 20 – 30 دقيقة.

- يفحص الراسب بواسطة أخذ جزء منه بواسطة ماصة ويوضع علي شريحةميكروسكوب وتغطي بغطاء الشريحة.

 

3-التعويم (Floatation)

 

وتستخدم هذه الطريقة لتحضير عيناتالبراز بغرض فحص الطفيليات التي تكون بويضاتها أخف وزنا من محلول الملحالمشبع وبالتالي تعوم البويضات علي السطح مثل بويضات الانكلوستوما ، الاكسيورس، الإسكارس غير الملقحة ، التينيا وبويضات التريكوكفلس ( تريكوريستريكيورا ) وبويضات الهتروفيس.

الخطوات :

 

- تؤخذ قطعة من البراز في حجم حبة الفول الصغيرة وتوضع في إناء من الزجاج سعة 60 مل مع قليل من الملح المشبع ( يحضر بإضافة واحد كيلو

جرام لكل 2 لتر ماء) بقدر ربع الإناء.

- تمزج قطعة البراز بواسطة مرود زجاجي.

- يصفي المحلول بمصفاة من سلك نحاسي معد لذلك – توضع المصفاة في القمع في فوهة القلماية ( دورق مخروطي ) .

- يكمل ملء القلماية الزجاجية بنفس محلول الملح حتى فوهتهاالعليا .

- توضع شريحة فوق فوهة القلماية.

- تترك لمدة 20 – 30 دقيقة ثم ترفع الشريحة باحتراس وتقلب وتوضعتحت الميكروسكوب.

 

4- مسحةشرجية لفحص الاكسيورس ( طريقة السيلوتيب)

The sellotape Swab For Enterobius Vermecularis

 

دودة الاكسيورس تعيش في الأمعاء الغليظة ، وتخرج أنثي الاكسيورس خارج فتحة الشرج ليلا وتضع بويضات الاكسيورس عليالجلد المحيط بفتحة الشرج ولهذا يتم عمل مسحة حتى يتم التقاط هذه البويضات.

وهناك أكثر من طريقة لعمل هذه المسحة وسوف نشرح اسهل هذه الطرق أكثرها شيوعا من الناحية العملية.

الطريقة :

 

- خذ قطعة من السيلوتيب الشفاف واثنيها علي طرف خافض لسان خشبيأو أنبوبة اختبار بحيث يكون سطحها اللاصق للخارج.

- ضع الخافض أو الأنبوبة بين فخذي الطفل بحيث يصل ألي منطقةالشرج فإذا وجدت بويضات الاكسيورس فسوف تلتصق علي السيلوتيب.

- الصق السيلوتيب علي شريحة ميكروسكوب ثم افحصها تحت الميكروسكوب.

- كن حريصا حتى لا تلوث يداك وذلك بلبس قفاز بلاستيك.

- بويضات الطفيليات الأكثر شيوعا والتي يمكن رؤيتها بالميكروسكوبسواء بصبغة أو بدون.

الفرق بين عينه السيرم والبلازما

 

الفرق بين عينه السيرم والبلازما

 

الصوره اللي قدمنا هنلاحظ تلات طبقات

1- ده عباره عن السيرم بتاع الدم وبنستخدمه لتحاليل المكونات الكيميائيه للدم

2- الطبقه التانيه دي عباره عن الجلطه وبتتكون من خيوط الفبرينوجين

3- الطبقه التالته عباره عن كرات الدم البيضا والحمرا والصفائح الدمويه

دي اسمها عينه سيرم بدون خيوط الفبرينوجين

وعشان نحصل علي عينه زي دي

نسحب الدم ف انبوبه جافه ونظيفه مفهاش اي ماده كميائيه ولا مانع تجلط

نحط العينه ف حمام مائي الي ان تتجلط

نحرك العينه بخفه ونضعها ف جهاز الطرد المركزي

ملاحظات

لو اختلط لون السيرم الاصفر بالاحمر يبقي العينه فيها "Hemolysis"

عباره عن تكسير كرات الدم الحمرا

وده اما نتيجة خطأ في السحب

أو لسبب مرضي

لازم نسحب عينة تاني لو ده نتيجه السحب الخاطئ أو وضع العينه ف الانبوبه بطريقه خاطئة

لان في تحاليل بتأثر فيها ال Hemolysis

2- احينا بيكون للون السيرم ابيض ده بيكون نتيجه اما وجبه دسمه تناولها المرض أو خلل في الجسم

لو كان ناتج من تناول غذاء معين المفترض نلب من المريض عينه أخري

التحاليل اللي بنعملها بعينه سيرم

-وظائف الكبد ووظائف الكلي والاملاح والpcr والبروتين والهرمونات

وكل ما يخص كيميا الدم

وأحينا ممكن نستخدم البلازما (اللي مضاف لها مانع تجلط )

بس ممكن يحصل تداخل بين مانع التجلط ومكونات الدم

مثلاا

ال EDTA مركب كلابي لو هنعمل تحليل كالسيوم واحنا مستخدمينها كمانع تجلط ممكن يحصل خطأ ف النتائج

اختبار التوافق الدموي(المبدا,الطريقة,الوصف) Croos Matching

 اختبار التوافق الدموي(المبدا,الطريقة,الوصف) Croos Matching

Cross Matching (Compatibility Testing

اختبــــار التوافــــق

• هذا الاختبار يجرى في حالة طلب نقل دم لمريض

• هذا الاختبار يجرى فقط على عينات الدم RBCs ، Packed Cells

• مبدأ الاختبار Principle of the test :

هي وجود توافق بين المريض المستقبل والدم المتبرع به

بحيث أنه لا يوجد أجسام مضادة Antibodies في المريض المستقبل للدم قد تؤدي إلى تفاعلات Reaction خطيرة من خلالها يعامل جسم المريض الدم المنقول له بأنة جسم غريب مما يؤدي إلى مشاكل كثير قد تصل في بعض الأحيان إلى الوفاة .

• يجرى اختبار الكنترول Control لعينة المريض فقط وذلك من أجل تحديد ما إذا كان المريض عنده مشاكل مناعية داخلية مثل بعض الأمراض المناعية أو بسبب كثرة نقل الدم سابقاً أو إصابات ميكروبية سابقة أدت على وجود الأجسام المضادة وغيرها من الأسباب قد تؤدي إلى رفضه للدم المنقول وذلك لسبب مشاكل في جسم المريض المستقبل نفسه وليس لوجود خطأ في توافق العينة من كيس المتبرع أو خطأ آخر من بنك الدم .

طريقة عمل اختبار Cross Matching

طريقة العمل على مرحلتين :

المرحلة الأولى وهي لعمل الـ Cross Matching :

1. يحضر أنبوب واحد One Tube لكل وحدة (كيس) دم Blood Unit مطلوبة حسب حاجة المريض .

2. يضاف إلى الأنبوب قطرتين 2 drops من سيرم المريض Patient Serum

3. يضاف إلى الأنبوب قطرتين 2 drops من دم (كيس) المتبرع Dilution of Cells (blood) of donor

4. تضاف قطرتين 2 drops من Bovine Albumin .

المرحلة الثانية وهي لعمل الـ Patient Control

1. يحضر أنبوب واحد One Tube للكنترول Control لكل عينة مريض يطلب اختبار التوافق Cross Matching بغض النظر عن عدد أكياس التبرع المطلوبة له .

2. يضاف إلى الأنبوب قطرتين 2 drops من سيرم المريض Patient Serum

3. يضاف إلى الأنبوب قطرتين 2 drops من سيرم المريض Patient Cells

4. تضاف قطرتين 2 drops من Bovine Albumin .

المرحلة المشتركة :

1. يوضع أنبوب الـ Cross Matching (المرحلة الأولى) وأنبوب الـ Patient Control (المرحلة الثانية) في Incubator على درجة حرارة 37مْ لمدة 30 دقيقة .

2. غسل Washing الأنبوبين (Cross Matching Tube و Patient Control Tube) ثلاث مرات بالـ Normal Saline بطريقة يدوية أو أوتوماتيكية .

3. يضاف إلى الأنبوبين قطرتين 2 drops من Coombs Serum أو ما يسمى بـ Anti Human globulin (AHG) .

4. يوضع الأنبوبين بجهاز الطرد المركزي Centrifuge لمدة 10-15 ثانية فقط وذلك من أجل مزج Mixجيد .

5. يفحص الأنبوبين تحت المجهر الضوئي ، إذا لم يحدث تخثر NonAgglutination فهي Compatible ، وإذا حدث التخثر Agglutination كانت Incompatible .

• إذا حدث التخثر Agglutination تحت المجهر في أنبوبة اختبار الـ Cross Matching يدل هذا على أنه لا يوجد توافق بين المريض وكيس المتبرع ، في هذه الحالة يتم تغيير كيس المتبرع بكيس متبرع آخر ويجرى نفس الاختبار المذكور أعلاه

• إذا تكرر عدم التوافق بين عينة المريض المستقبل وأكياس عديدة من دم المتبرعين يجرى اختبار Cross Matching بطريقة Warm Technique (التقنية الدافئة) وذلك بإجراء كل اختبار الـ Cross Matching أعلاه على درجة حرارة 37مْ .

وصف نتائج اختبار Cross Matching :

• في حالة التوافق Compatible

لا يكّون ارتباط بين الأجسام المضادة للشخص المستقبل للدم وانتيجينات خلايا دم المتبرع وبعد عمل الغسيل Washing تزول الأجسام المضادة ، وبعدها يضاف(Anti Human globulin) AHG والذي وظيفته البحث عن الأجسام المضادة الخاصة بالشخص المستقبل والتي زالت بواسطة الغسيل ، وبذلك تكون بالفحص تحت المجهر Non Agglutination (Compatible)

بعد ذلك يتم التأكد من التوافق بإضافة Coombs Control Cell (CCC) والذي وظيفته البحث عن AHG فيتكون الارتباط مع AHG المضاف سابقاً ، وبذلك تكون بالفحص تحت المجهر عكسية أي Agglutination (+)

• في حالة عدم التوافق Incompatible

يكّون ارتباط بين الأجسام المضادة للشخص المستقبل للدم وانتيجينات خلايا دم المتبرع وبعد عمل الغسيل Washing لا تزول الأجسام المضادة لأنها مرتبطة مع الانتيجينات ، وبعد إضافة AHG الذي يربط الأجسام المضادة المرتبطة مع الانتيجينات مع بعضها البعض حتى تكون أوضح بالفحص تحت المجهر والتي تكون نتيجته (+)Agglutination .

 

باختصار وبطريقة مبسطة

 اختبار التوافق Compatibility test .

يسمى هذا الاختبار باسم Cross matching أو X matching .

 - ويجرا هذا الاختبار لتأكد من توافق فصائل الدم بين دم المتبرع ودم المستقبل ، ويعطى المستقبل فصيلة دم مقاربة

خطوات العمل :-

1- اخذ قطرتين من دم المتبرع ويتم غسل كريات الدم الحمراء بمحلول فسيولوجي متعادل normal saline.

2- يتم فصل سيرم دم المريض وتوضع قطرتين من السيرم مع كريات الدم الحمراء المغسولة سابقا .

3- وضع الأنبوبة المحضرة في جهاز الطرد المركزي لمدة 10 ثواني عند 500لفه / دقيقة .

4- يتم فحص الخليط تحت الميكروسكوب لتأكد من وجود تكتل لكريات الدم الحمراء أو تحلل دموي ، في حالة وجود ذلك تعتبر عينة دم المتبرع غير مطابقة لعينة دم المستقبل ويتم اخذ عينة دم أخرى ومعاملتها حسب الخطوات السابقة بعد التأكد من مجموعات الدم (A'B'O System) .

5- في حالة عدم وجود تجلط توضع نقطتين من كاشف (AHG)Anti human globulin و يتم تحضين الأنبوبة في حمام مائي عند 37ْم لمدة 20-30 دقيقة .

6- توضع الأنبوبة في جهاز الطرد المركزي من 10-15 ثانية عند 500لفة / دقيقة .

7- يتم فحص قطرة من الأنبوبة على شريحة زجاجية تفحص تحت الميكروسكوب في حالة عدم وجود تكتل لكريات الدم الحمراء تعتبر فصيلة دم المتبرع موافقة لفصيلة دم المستقبل .

قسم الهيماتولوجى Haematology

  قسم الهيماتولوجى Haematology "

< تحليل صورة الدم الكاملة >

> Complete Blood Chemographic <

نستكمل سويا اخر جزء فيصورة الدم وهو ازاى اعد خلايا الدم البيضاء وازاى افرد فيلم دم واصبغه للعد النوعي لخلايا الدم البيضاء ........

-----> اولا :- تعداد كرات الدم البيضاء WBC, white blood cell :-

ويمكن تسميتها ايضا Total Leucocyte Count , TLC وهو يفحص التعداد الإجمالي لكريات الدم البيضاء .

- وظيفة كريات الدم البيضاء مكافحة الجراثيم، الفيروسات التي تهاجم الجسم وأيضا الخلايا السرطانية.

- هناك عدة أنواع ومجموعات من كريات الدم البيضاء : -

ازينوفيل ، ليمفوسيت ، نيتروفيل ، مونوسيت , بازوفيل .

- وحسب نوع التلوث يتحدد ارتفاع عدد كريات في احدى المجموعات

- على سبيل المثال :-

في التلوث الذي يتسبب من الجراثيم يزداد خاصة خلايا النيتروفيل ، والتلوث المتسبب من الفيروسات يزداد الليمفوسيت والمونوسيت وفي حالة الحساسية أو تلوث بسبب طفيليات تزداد كلا من الايزينوفيل البازوفيل .

----> ثانيا : متى يوصى بإجراء فحص كرات الدم البيضاء ؟؟؟؟؟

عند وجود شك لمرض تلوثي، أو عند وجود شك في تراجع في عمل جهاز المناعة .

-----> ثالثا : المستوى الطبيعي لخلايا الدم البيضاء :-

4000 حتى 11000

----------> ما معنى قيم منخفضة عن المستوى الطبيعي ؟؟؟؟؟

في هذه الحالة التعبير الطبي هو لويكوبينيا Leucopenia والمعنى هو تراجع وقصور في عمل جهاز المناعة. يمكن لهذا أن يحدث نتيجة لتلوثا ت حادة، من أمراض فيروسية مختلفة مثل الايدز أو حتى بسبب فيروسات اقل خطورة منه، التي تسبب قصور عابر لجهاز المناعة. وأيضا الأدوية ضد الأورام سرطانية يمكنها أن تسبب بوجود قيم منخفضة.

وأحيانا هناك قيم منخفضة بسبب ميول للويكوبينيا عند مجموعة دون وجود مغزى طبي وفي هذه الحالة تعتبر قيم سليمة، كما هو الحال عند اليمنيين في البلاد ، وتدعى هذه الحالة لويكوبينيا أثينية.

----------> ما معنى قيم أعلى من المعدل الطبيعي ؟؟؟؟؟

عند وجود ارتفاع كبير في كريات الدم البيضاء بالدم Leucocytosis، غالبا ما يدل هذا على وجود تلوث. يمكن معرفة نوع التلوث من نوع كريات الدم البيضاء التي سجل فيها الارتفاع. إذا كانت القيم كبيرة جدا, بشكل حاد فوق عشرات الآلاف يمكن أن تولد الشك بوجود سرطان الدم (لويكيميا ) .

----> رابعا : طريقة عد خلايا الدم البيضاء :-

1.. طريقة تحضير المحلول الخاص بعد خلايا الدم البيضاء :-

- يتم ذلك باضافة (20 مل) من المحلول (Glacial acetic acid)

مع (من 1 الى 2 نقطة) من (methylene blue) ....

2.. خطوات العمل :-

- يتم اضافة (950 ميكرون ) من المحلول التى تم تحضيرة..الى انبوبه الاختبار..

- يتم اضافة (50 ميكرون) من الدم + EDTA الي انبوبة اختبار .

- يتم خلط العينة جيداااااا لمدة دقيقتين...

او :-

- يتم اضافة (380 ميكرون ) من المحلول التى تم تحضيرة..الى انبوبه الاختبار..

- يتم اضافة (20 ميكرون) من الدم + EDTA الي انبوبة اختبار .

- يتم خلط العينة جيداااااا لمدة دقيقتين...

ثم بعد ذلك

- يتم اخذ (20 ميكرون) من الخليط بواسطة الماصة الاوتوماتيكية...

- يتم وضعهم فى شريحة العد ... الهيموسيتوميتر... في ال Chamber المخصص لذلك .

- يتم عد كرات الدم البيضاء فى (4) مربعات بالميكروسكوب باستخدام العدسة 10X او 40X ....

--------> طريقة ثانية

- بواسطة المجهر وشريحة العد Haemocytometer

- محلول التخفيف يحلل كريات الدم الحمراء ويصبغ انويه كريات الدم البيضاء بلون بنفسجي فيسهل عدها.

- كيفية العمل :-

1- يخفف الدم 2:1 باستخدام الماصة ذات الانتفاخ المدرجة 0.5 ، 1 ، 11 بملئها بالدم حتى علامة 0.5 ثم بالمحلول حتى علامة 11.

2- يمكن عمل نفس التخفيف 20 ميكروليتر إلى 0.38 مل من المحلول ( باستعمال الماصة الأوتوماتيكية ) في أنبوبة زجاجية.

3- ترج الأنبوبة جيدا.

4- تملا شريحة العد بواسطة ماصة باستير بعد وضع غطاء زجاجي للشريحة.

5- تعد كريات الدم البيضاء في المربعات الأربعة الخارجــــية باستخدام العدسة الشيئية ( *10) للمجهر

-----> خامسا : طريقة الحساب :-

- مجموع عدد كرات الدم البيضاء فى الاربع مربعات ... ويتم ضربهم فى العدد (50)

- في بعض المعامل بتقوم بعد مربع واحد وتقوم بضرب في العدد 200 .

- وفي بعض المعامل الاخري تقوم بعد اي مربعين متقابلين وتقوم بالضرب في العدد 100 .

ولكن الافضل اننا نقوم بعد الاربع مربعات ونقوم بضرب مجموع الاربع مربعات في العدد 50 .

------> سادسا : بعض الاحتياطات الواجب اتخاذها لضمان صحة النتائج :-

1- عدم وجود فقاعات هوائية بشريحة العد...

2- بعد ان يتم وضع العينة فى شريحة العد ..يجب الانتظار لمدة دقيقتين لكى يتم ترسيب الخلايا .. وبالتالى القدرة على عدها بطريقة صحيحة..

3-عدم ترك شريحة العد لاكثر من دقيقتين..لكى لا يجف المحلول...

4- يجب التأكد من نظافة الشريحة وغطائها الزجاجي قبل الاستخدام

5- يجب استخدام الغطاء الزجاجي المخصص لشريحة العد وذلك لأنه سميك و ثقيل بالقدر الكافي

-------> سابعا : العد النوعي لكريات الدم البيضاء Differential Leucocytic Count :-

كما ذكرنا من قبل انه يحدد النسبة المئوية لكل نوع من خلايا الدم البيضاء ويأتى بالكشف عن كل نوع من خلايا الدم البيضاء في كل مائة كرة بيضاء متتالية في افلام مفروده ومصبوغة .

* * تحضير أفلام الدم : -

1. تنظف الشرائح جيدا قبل استعمالها مباشرة.

2. توضع نقطة صغيرة من الدم علي بعد 1 – 2 سم من أحـــــد أطرافها في منتصف الشريحة .

3. تفرد نقطة الدم باستعمال شريحة أخري طرفها أملس ناعم ( ويفضل أن يقل عرضها عن الأولى ) يوضع هذه الشريحة فوق الشريحة الأولي بزاوية 45 ْ وتحرك إلى الوراء حتى تفرد نقطة الدم وتملأ خط التماس بين الشريحتين.

4. يفرد الفيلم بسرعة وبخفة إلى الأمام .

5. يترك الفيلم في الهواء ثم يصبغ بصبغة ليشمان.

* * هناك بعض المواصفات للفيلم الجديد وهى كالاتى : -

1. متوسط السمك.

2. يملأ ثلثي الشريحة.

3. له راس وذيل.

4. الدم المفرود غير متقطع علي الشريحة.

* * طريقة صبغ الأفلام بـ(صبغة ليشمان) : -

1. توضع الشريحة علي حامل حوض الصبغة.

2. توضع الصبغة وتترك لمدة 2 – 3 دقائق.

3. يضاف ماء مقطر ضعف كمية الصبغة ويتم مزج الماء بالصبغة.

4. تترك الصبغة المخففة لمدة 7 – 10 دقائق علي الشريحة.

5. تغسل الشريحة بالماء الجاري لمدة دقيقتين ويترك الفيلم ليجف وتنظف الجهة الأخرى من الشريحة لإزالة بقايا الصبغة.

* * طريقة فحص الأفلام : -

تعد كريات الدم البيضاء باستخدام العدسة الزيتية في خط يقطع الفيلم بالعرض من الرأس للذيل بعيدا عن الأطراف الجانبية حتى يتم عد 100 خلية بيضاء.

ولتحقيق نتيجة اكثر دقة يعد 200 خلية بيضاء..

بعد ذلك نقوم بحصر عد كل نوع يمثل كم في ال 100 خلية ..

ما هى الاسباب التى تمنع من نمو مزرعه البول مع وجود صديد

 ما هى الاسباب التى تمنع من نمو مزرعه البول مع وجود صديد over 100  

سؤال بيتكرر كثيرا

عينه بول بها صديد over 100 وعند عمل urine culture the result no growth bacterial ؟

عشان نجاوب على السؤال لابد ان نعرف الاول اسباب الصديد

اسباب الصديد فى البول ؟

ماذا يريد الطبيب ان يعرف من خلال المزرعة : يريد ان يعرف هل هذا الصديد بسب عدوى بكتيرية ام عدوى فيروسية ام عدوى مناعية ام عدوى جنسية واذا كان هناك عدوى بكتيرية فما نوع هذة البكتريا وما هو اقوى مضاد قاتل لها

اولا ...

ممكن نتيجة عدوى بكتيرية ( الكلى – الحالب – المثانه - التهاب فى البروستاتا ) الجهاز التناسلى 

..طيب هل البكتريا التى تصيب الكلية والمثانة ( الجهاز البولى ) نفس البكتريا التى تصيب البروستاتا ( الجهاز التناسلى )

: بصفة عامة لابد ان نزرع كل عينة على الميديا المخصصة لها فمثلا عينة البول تزرع على ميديا خاصة بالبول مثل ال CLED واذا لم تكن هذة الميديا متوفرة نزرع على ميديا الدم Blood agar و MacConkey Agar

فأذا كان الشخص يعانى من عدوى بكتيرية جنسية تصيب الجهاز التناسلى مثل البروستاتا فهذا يعنى ان هذة البكتريا قد لاتنمو على ميديا الدم Blood a agar وخصوصا ال chlamydia وايضا بكتريا السيلان Nesseria Gonorrhea التى تحتاج الى ميديا خاصة Thayer Martin agar or chocolate agar

او حتى بكتريا التى تسبب ال tuberculosis فهى بكتريا لاتنمو على الميديات العادية

خلاصة الموضوع انه قد يكون سبب الصديد عدوى بكتيرية تحتاج الى ميديا خاصة حيث انها لاتنمو بسهولة على الميديا العادية ( مثل بكتريا التى تصيب الجهاز التناسلى مثل بكتريا السيلان او الكلاميديا او حتى بكتريا الدرن)

ثانيا

===

ممكن يكون التهاب فيروسى او طفيلي او مناعى ( سؤال هل الالتهاب الفيروسى او الطفيلي او المناعى سوف يعطى نمو على مزارع البكتريا )

الجواب ... كلا

: قد يصيب الجهاز البولى او الجهاز التناسلى عدوى فيروسية او طفيلي او التهاب مناعى ( فى الكلية ) او احتقان ( فى البروستاتا ) او اى شئ غير بكتيرى يؤدى الى وجود صديد بدون نمو بكتيرى على الميديات المخصصة للبول فيؤدى ذلك الى مايعرف ب Sterile pyuria

ثالثا

 

ولا ننسى طبعا تناول المريض للمضاد الحيوى قبل اجراء المزرعة من احد الاسباب التى تعطى عدم نمو بكتيرى كاذب false no growth

لابد ان نعلم ايضا ان اشهر انواع البكتريا التى تصيب الجهاز البولى وتسبب Urinary tract infection UTI هى بكتريا ال E coli وهى الاشهر نسبة اصابة للمجارى البولية بنسبة 85 % ويليها بالترتيب على حسب نسبة الاصابة

Klebsiella

pseudomonas

proteus

other gram -ve bacteria

Staph aureus

فى النهاية اذا تأكدت من سلامة العينة ومن الاحتياطات المتبعة لأخذ العينة وعدم تناول المريض اى مضاد حيوى قبل اجراء المزرعة بمدة 48 ساعة والاخصائى متأكد من طريقة الزراعة واستخدام الميديا المناسبة ولم يجد اى نمو بكتيرى على المزرعة فيمكنة ان يخرج النتيجة بكل بساطة No growth

ولا داعى لكتابة توصيات او تعليقات على التقرير

واذا وجدت اى خلل فيما سبق يمكن ان يشرح للمريض الطريقة الصحيحة لأخذ العينة والاحتياطات والسماع الى شكوى المريض للتأكد من ان الاصابة بالجهاز البولى وليست بالجهاز التناسلى ( المريض لم يمارس اى علاقة غير شرعية ) ويقوم بأعادة زراعة العينة مرة ثانية على الميديا المخصصة لذلك

<p> </p>

ملحوضة : فى حالة الاصابة بالسيلان يؤخذ العينة urethra discharge وتزرع على ميديا Thayer Martin agar or chocolate agar

فى حاله عدوى البكتيرية للبروستاتا bacterial prostatitis يؤخذ عينة prostatic discharge من urethra بعد ان يقوم الطبيب بعمل مساج لغدة البروستاتا وتزرع على ميديا blood - maconccey – chochalete

القاتل الكامن ال HIV

 القاتل الكامن ال HIV  

يعتبر فيروس ال HIV من الفيروسات القاتلة وبشدة ومتخصص بإصابة الجهاز المناعي وخاصة خلايا ال T- CELL بكافة انواعها حيث يعمل على تحطيم دفاعات الشخص المصاب ويوجد نوعين منه HIV1 , HIV2 النوع المنتشر اكثر هو HIV1 ويقدر عدد المصابين بهذا الفيروس حول العالم ب15 مليون شخص حول العالم. المادة الوراثية لهذا الفايروس هي ال RNA وهو المسبب الرئيسي لمرض الايدز AIDS .

تحصل الاصابة وذلك بعد دخول الفيروس الى داخل الجسم ثم يقوم بمهاجمة خلايا ال T- CELL عن طريق ارتباط مستقبل يدعى الـ GP 120 موجود على سطح الفيروس بمستقبل يدعى الـ CD4 موجود على سطح خلايا ال T-CELL ثم بعدها يرتبط الفيروس بمستقبل ال CCR5 الموجود على سطح خلايا ال T-CELL بعد ذلك يقوم مستقبل اخر مرتبط بمستقبل ال GP120 يدعى ب GP41 بإحداث ثقب في الغشاء البلازمي حيث يدخل الفيروس الى داخل الخلية بعد دخول الفيروس يقوم بنزع غلافة الخارجي لعدم حاجة الفيروس اليه لأنه يأخذ الغلاف الجديد من الخلية المضيفة له بعد دخوله اليها ثم بعدها يقوم بتحويل مادته الوراثية من RNA الى DNA وذلك عن طريق انزيم فريد من نوعه يدعى REVERASE TRANSCRPTIASE ويقوم بحقن مادته الوراثية داخل المادة الوراثية لل T –CELL ثم بعدها تقوم خلايا ال T-CELL باستنساخ جينوم الفيروس ويذهب الجزء المستنسخ الي هو mRNA الى رايبوسومات الخلية المضيفة لغرض بناء البروتينات الفيروسية مثل الانزيمات التي يحتاجها الفيروس لغرض اصابة خلايا اخرى ثم بعد ذلك يقوم الفيروس بالالتصاق الغشاء البلازمي للخلية ومن هناك ياخذ غلافه الخارجي بعملية التبرعم BUDDING وبالتالي يصبح مهيئ لغرض اصابة خلايا اخرى .

وحسب وجهة نظري الفيروس هنا اكثر ذكاء من خلال اصابته لل T –CELL حيث يقوم بقطع الجسر الرابط بي ال MACROPHAGE وال B-CELL الا وهو القضاء على ال T- CELL

الموضوع ببساطة وبدون تكلف ...........

الفيروس عندما يدخل الى داخل الخلية لا يقوم بدفر الباب على الخلية بل على العكس من ذلك يقوم بطرق الباب على الخلية فيخرج له ابو البيت CD4 ويطلب منه الابن الاصغر له وهو CCR5 يقوم باستقباله على اتم وجه ويدخله الى داخل غرفة الاستقبال (النواة) وحتى يخلون مخدة وره ضهره من يكعد وطبتهم وطلعتهم سوية وسوالف وضحك ثم بعد ذلك يكلب الفيروس عليهم ويجعلهم يعملون تحت امرته ويفعلون ما يطلب منهم .

تأثير مكان تجميع الدم على مكوناته

تأثير مكان تجميع الدم على مكوناته

عند سحب العينة من مواقع مختلفة فإن مكونات الدم كذلك تختلف ففي عملية ثقب الجلد Skin Puncture يشبه الدم الشرياني الدم الشعيري أكثر من الدم الوريدي ولهذا فإنه من الناحية المخبرية لا يوجد اختلافات واضحة بين الدم الشعيري والدم الشريان في كل من قيمة الرقم الهيدروجيني PH والضغط الجزيئي للأكسجين Po2 والضغط الجزيئي لثاني أكسيد الكربون Pco2 وتشبع الاكسجين ، بينما الضغط الجزيئي لثاني أكسيد الكربون في الأوردة يكون أعلى حيث يصل ضغطه من 6 إلى 7 مل زئبق ويقل جلوكوز الدم في الاوردة بحوالي 7 مجم / 100 مل (0.39 ملليمول/لتر) من مستوى الجلوكوز في الدم الشعيري نتيجة لاستهلاك الأنسجة له .

تحلل الدم Hemolysis

إن تكسر كريات الدم الحمراء بواسطة تحلل الدم تحدث داخل الجسم الحي Invivo وكذلك في أنابيب الاختبار Invitro وهذه العملية يمكن أن تتم تحت ظروف وحالات عديدة منها :

1- التناضح Osmotically

نظراً لأن غشاء الكرية الحمراء يسمح بنفاذ الماء فإن حجم الخلية يتغير تبعاً لتغير الوسط التناضحي فإذا وضعت الكريات في محلول منخفض التوتر Hypotonic فإن الماء ينفذ إلى داخل الخلية وتتفتح الخلية وتتغير صفات الغشاء وتنشأ به قنوات دقيقة تسمح بمرور الهيموجلوبين وغيره من محتويات الخلية وتنتشر في السائل المحيط بالخلايا . 

2 – تحلل الدم المرضي يحصل في الحالات التالية :

أ - الأنيميا أو فقر الدم الحاد Hemolytic Anemia وكذلك في حالة اليرقان عند الأطفال حديثي الولادة Jaundice

ب - زيادة الهيموجلوبين المفاجيء في البول Paroxysmal Hemoglobinuria

3 - تحلل الدم الناتج عن تناول بعض العقاقير :

ان بعض العقاقير تسبب تحلل كريات الدم الحمراء ومنها الكينين Quinine والفيناسيتن Phenacetin والنيترات Nitrites والكلورات Chlorates

4 – المذيبات الدهنية

مثل الكحول ، الإيثر ، الكلوروفورم وبعض المواد مثل الصابون وأملاح الصفراء ومادة السابونين Saponin وهذه المواد تذيب الدهون في غشاء الكرية الحمراء أو تغير اتجاهات ترتيب جزيئات الدهون في الغشاء الخلوي

5 – الطرق الميكانيكية

تلعب الطرق الميكانيكية دوراً هاما بالتأثير السلبي على العينات المختلفة خاصة عينات الدم ومن هذه الطرق الطحن Grinding ، التحريك Stirring أو الرج الشديد Shaking وكذلك تكرار التجميد والتسييح Thawing

كما أن هناك بعض العوامل الأخرى التي تؤدي إلى تحلل الدم في الأنابيب مثل التغير في درجة الحرارة والرقم الهيدروجيني والتعرض للأشعة فوق البنفسجية ، و يتأثر تركيز مكونات السيرم بتركيز الهيموجلوبين في العينة المنجلية إلى أكثر من 20 مجم / 100 مل ويوجد درجتان لتحلل عينة الدم أولها خفيف Slightly Hemolysis وهذا تأثيره قليل على معظم التحاليل الكيميائية ، والنوع الثاني هو التحلل الحاد للدم Server Hemolysis الذي يؤثر على تخفيف المكونات التي توجد بتركيز قليل داخل كريات الدم الحمراء أكثر من تأثيره على المكونات الموجودة في البلازما (حيث يؤدي التحلل الحاد إلى زيادة العناصر الموجودة في داخل الخلايا نسبة إلى خارج الخلايا وزيادة تركيزها مثل الصوديوم والبوتاسيوم وأنزيم LDH ...الخ) وعلى العموم فإن التأثير الواضح يمكن ملاحظته على المكونات الموجودة في البلازما لهذا فإن التركيز في البلازما يزداد في العينة المتحللة في الاختبارات التالية إنزيم الألدولاز Aldolase وإنزيم الفوسفاتاز القلوي وإنزيم LDH وإنزيم ايزوستريت نازع الهيدروجين والبوتاسيوم والمجنيزيوم والفوسفات ويزداد كذلك الفوسفات الغير عضوي في السيرم بسرعة مثل الأستر العضوي الموجود داخل الخلايا التي تكون متحللة وكذلك تزداد نشاطية إنزيمي أمينو ترانسفيراز (GOT, GPT) بنسبة 2% لكل 10مجم / 100 مل الناتج عن الزيادة في تركيز الهيموجلوبين وكذلك فإن إنزيم LDH يزداد بحوالي 10% لكل 10 مجم / 100 مل من الهيموجلوبين ، ونستطيع معرفة عينة الدم المتحللة بالنظر إليها بالعين المجردة . 

حفظ الدم

من المفضل دائماً إجراء التحاليل بالسرعة الممكنة وعند الخزن تحفظ جميع العينات بعد فصل السيرم أو البلازما مبردة لغرض تأخير التفاعلات الكيميائية وبالتالي الحيلولة دون تغيير نسب المكونات ودرجة الحرارة المناسبة للحفظ من 2 – 4 م ، حيث تحدث تغيرات قليلة في هذه الدرجة خلال عدة ساعات من تركها في الثلاجة وتحفظ عينات الدم لتحليل السكر والبيروفيت بعد إضافة مادة حافظة .

وعند تخزين العينات لمدة طويلة لقياس الانزيمات مثلاً فإنه يجب تجميدها بدرجة حرارة (-20 م) بعد فصل السيرم بأسرع وقت ممكن ويفضل أن تقسم العينات إلى حجوم صغيرة قبل تجميدها تجنباً لتكرار عملية الإذابة والتجميد مرة ثانية مما يؤدي إلى تغير أساسي في تركيب البروتينات والإنزيمات وعند إجراء التحليل تترك العينة لتذوب ببطيء بدرجة حرارة الغرفة ثم تمزج بهدوء لكي نحصل على عينة متجانسة .

ولجمع عينات الدم ينصح بتباع الاحتياطات التالية :

1 - يفضل جمع عينات الدم من المرضى في الصباح الباكر وقبل الإفطار إلا في حالات خاصة .

2- فحص الأنبوب الذي سيوضع فيه الدم ويجب أن يكون جاف حيث أن وجود الرطوبة يؤدي إلى تكسر خلايا الدم والتأكد من كون صلاحية الأنبوب غير منتهية .

3 - يجب الإشارة إلى نوع العلاج الذي يتناوله المريض

4 - يجب تجنب استعمال الضغط السالب عند سحب الدم بل يترك الدم ينساب من الوريد إلى المحقنة ببطء وكذلك عندما يفرغ من المحقنة إلى الأنبوب الخاص بالحفظ يفرغ ببطء وذلك لمنع تكسر كريات الدم .

5 - يجب عدم المبالغة في استخدام المواد المانعة للتجلط (التخثر)

6 - بعد سحب العينة يجب الإسراع بنقلها إلى المختبر حيث أن حفظ الدم في درجات حرارة منخفضة يؤدي إلى تحلل الخلايا واضطراب توزيع الأيونات بصورة خاصة